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StressMarq—Alpha 突觸核蛋白產品推薦(1)

更新時間:2024-03-12   點擊次數:834次

 StressMarq——Alpha 突觸核蛋白產品推薦(1)


前體原纖維 (PFFs)來源物種表達系統突變型/WT目錄號
Alpha 突觸核蛋白PFF (1)E. ColiWTSPR-322
Alpha 突觸核蛋白PFF (1) (ATTO 594 標記的)E. ColiWTSPR-322-A594
Alpha 突觸核蛋白PFF (1)小鼠E. ColiWTSPR-324
Alpha 突觸核蛋白PFF (2)E. ColiWTSPR-317
Alpha 突觸核蛋白N-末端乙?;?/span>PFF (1)E. ColiWTSPR-332
Alpha 突觸核蛋白A53T 突變型 PFF (1)E. ColiA53TSPR-326
Alpha 突觸核蛋白S87N 突變型 PFFE. ColiS87NSPR-500
Alpha 突觸核蛋白PFF大鼠E. ColiWTSPR-482
Alpha 突觸核蛋白纖絲 (未成熟的原纖維)*E. ColiWTSPR-450
Tau-352 (胚胎 0N3R)  Alpha 突觸核蛋白共聚集體原纖維E. ColiWTSPR-494
Tau-441 (2N4R)  Alpha 突觸核蛋白共聚集體原纖維E. ColiWTSPR-495
Alpha Synuclein S129A 突變型PFFE. ColiS129ASPR-506
Alpha Synuclein TNG (A53T, S87N, N103G) 突變型PFFE. ColiA53T, S87N, N103GSPR-504

* 由于操作不同可能含有少量的不溶纖維。


寡聚體來源物種表達系統突變型/WT目錄號
動態學穩定的 Alpha 突觸核蛋白寡聚體E. coliWTSPR-484
鹽酸多巴胺穩定的 Alpha 突觸核蛋白寡聚體E. coliWTSPR-466
EGCG穩定的 Alpha 突觸核蛋白寡聚體E. coliWTSPR-469
單體來源物種表達系統突變型/WT目錄號
Alpha 突觸核蛋白單體 (1)E. coliWTSPR-321
Alpha 突觸核蛋白單體 (2)E. coliWTSPR-316
Alpha 突觸核蛋白單體 (1)小鼠E. coliWTSPR-323
Alpha 突觸核蛋白A53T 突變型單體 (1)E. coliA53TSPR-325
Alpha 突觸核蛋白S87N 突變型單體E. coliS87NSPR-499
Alpha 突觸核蛋白N-末端乙酰化的單體 (1)E. coliWTSPR-331
Alpha 突觸核蛋白單體大鼠E. coliWTSPR-481
Alpha Synuclein S129A 突變型單體E. coliS129ASPR-505
Alpha Synuclein TNG (A53T, S87N, N103G) 突變型單體E. coliA53T, S87N, N103GSPR-503

Alpha 突觸核蛋白產品類型:PFF

不同類型蛋白看起來形態相似, 但是特性不同

StressMarq——Alpha 突觸核蛋白產品推薦(1)

來源: 

1型原纖維(左上) 和纖絲(右下) 的EM來自加拿大維多利亞大學。

2型原纖維 (右上) 和A53T 突變型原纖維 (左下) 的EM 來自加拿大英屬哥倫比亞大學。

 

Alpha 突觸核蛋白產品類型: PFFs

StressMarq提供人、小鼠和大鼠Alpha 突觸核蛋白PFFs

StressMarq——Alpha 突觸核蛋白產品推薦(1)

原纖維在浴式超聲儀 (QSonica) 中以 80% 振幅進行超聲處理(開啟 30 秒,關閉 30 秒,10°C 下 30 個循環)。原纖維用乙酸雙氧鈾進行負染色,并在加拿大多倫多大學的 Talos L120C 透射電子顯微鏡中觀察。

來源:Atuka Inc.。



硫磺素 T 聚集測試

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單體濃度: 100 µM;原纖維濃度: 10 µM

來源:StressMarq Biosciences 內部數據


單克隆抗體選擇性靶向病理性人 Alpha 突觸核蛋白PFFs

不列顛哥倫比亞大學的研究人員使用 StressMarq 的 Alpha 突觸核蛋白原纖維(目錄號 SPR-322)通過計算設計了一種小環肽,該肽表現出與原纖維相同的神經毒性和聚集活性。他們通過肽支架免疫產生了有高度選擇性的單克隆抗體,能夠抑制α突觸核蛋白原纖維的致病作用。這項研究可能在α突觸核蛋白靶向治療突觸核蛋白病方面具有重要應用。


StressMarq——Alpha 突觸核蛋白產品推薦(1)

mAb 抑制 PFF 攝取和細胞內聚集體形成。將原代大鼠海馬神經元培養物暴露于超聲處理的人 PFF(目錄號 SPR-322,1 μg/mL)中,不含或含 mAb(0.05 μM,PMN09 是0.25 μM)。 14天后染色處理,神經元標記物MAP2 (綠色), 人 α-syn 聚集體(紅色)和細胞核(藍色)染色。


StressMarq——Alpha 突觸核蛋白產品推薦(1)

mAb 抑制 PFF 聚集活性。在單獨添加 α-syn 單體 (100 mM) 后或在超聲處理的人 PFF (10 nM) 作為引種劑的情況下,不添加或添加 mAb (0.1 nM),每小時用 ThT 熒光測定(每次讀數前搖動 30 秒)跟蹤聚集情況。

來源:Gibbs, E. et al. 


帕金森樣病理學在初級神經元中的誘發

超聲處理的 1 型 α-突觸核蛋白原纖維 (4 µg/ml) 誘導原代大鼠神經元中絲氨酸 129 的磷酸化,這是在 PD 中觀察到的典型修飾現象。

孵育 14 天后進行 p-Ser129 染色:

◆ 1型原纖維在14天內誘發原代大鼠神經元中的帕金森樣病理學

◆ 2型原纖維沒有這個現象

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來源: Associate Professor Rehana Leak, Duquesne University, USA





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